作者：Sakharov DV, Bunschoten A et al.
光动力治疗（PDT）是一种新兴的癌症治疗手段，基于光敏剂化合物在可见光照射下产生高活性氧物质（ROS），这些ROS可氧化细胞内各种含有光敏剂的生物分子，但这种高度活性的作用半径仅限于其产生部位周围5-20nm的范围。
利用对ROS敏感的探针乙酰酪胺荧光素（acetyl-tyramine-fluorescein，acetylTyr-Fluo）检测PDT过程中胞内蛋白质的氧化作用。此探针标记在酪氨酸残基上发生氧化的胞内蛋白，这种氧化作用类似于二酪氨酸形成的反应。凝胶电泳与随后采用抗荧光素抗体的免疫印迹法，可以看到荧光素标记的蛋白。
对含有光敏剂Hypocrellin A的大鼠或人成纤维细胞作PDT处理后，产生一组标记的胞内蛋白，与用H2O2处理细胞时所标记的蛋白是不同的。2D电泳也证实了标记类型的差异性，表明两种氧化应激条件下氧化的是一组有限但明显不同类型的蛋白。
通过对比Western Blotting免疫印迹法和银染蛋白图谱，我们推断alpha-微管蛋白和beta-微管蛋白是PDT引起蛋白氧化的作用靶。
H2O2处理使内质网蛋白得到标记。在蛋白氧化程度相当的反应条件下，PDT引发大量细胞凋亡，而H2O2处理不影响细胞生存。
这提示Hypocrellin A-PDT引起的氧化应激能激活细胞凋亡途径，但细胞凋亡对H2O2处理不敏感。我们设想，Hypocrellin A中观察到的蛋白氧化方式反映了光敏剂的细胞内定位，acetylTyr-Fluo的应用也许有利于识别不同光敏剂-PDT引发蛋白氧化的作用靶。
原文：Eur J Biochem. 2003 Dec;270(24):4859-65.
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