血卟啉单甲醚对卵巢癌细胞系SKOV3的光动力学杀伤效应

　　作者：宋坤 孔北华 李莉 曲讯 杨兴升 王波 张友忠 姜洁 崔保霞 王立杰
　　单位：山东大学齐鲁医院妇产科  山东大学齐鲁医院临床基础研究所

　　背景与目的：光动力学治疗（photodynamic therapy，PDT）近年来逐渐成为一种新的可供选择的卵巢癌治疗手段。血卟啉单甲醚（hematoporphyrin monomethyl ether，HMME）是我国自主开发研制的一种新型光敏剂，本实验目的在于体外实验研究HMME在卵巢癌细胞系SKOV3细胞中的荧光显微成像，并验证其对SKOV3的光动力杀伤作用。

　　方法：30μg／ml HMME与细胞孵育不同时间后，置于高灵敏度荧光显微镜与激光共聚焦显微镜下检测HMME荧光及其细胞内的定位，形态学软件分析其荧光强度；不同浓度（5—50μg／ml）HMME与细胞孵育3h后，以不同能量激光（1．5、3、6、12J／cm^2）照射，MTT比色法检测细胞的存活率；以5μg／ml、3J／cm^2，20μg／ml、6J／cm^2剂量处理细胞，4h及24h后分别收集细胞行Annexin V／PI双染色，流式细胞仪分析细胞死亡方式。结果：HMME呈红色荧光弥漫性分布于细胞浆内，细胞内荧光强度于用药3h后达到高峰。高浓度HMME单独使用可能对细胞具有暗毒性。而单独激光照射对细胞存活无影响。随着HMME浓度与激光剂量的增加，细胞存活率逐渐下降。当HMME浓度增高到≥40μg／ml时．加大药物浓度与激光剂量细胞存活率并不随之降低。流式细胞仪分析结果显示HMME光动力学处理后死亡细胞主要为坏死细胞。

　结论：HMME对SKOV3细胞具有光动力学杀伤效应。