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酞菁染料光敏剂Pc4-PDT对多种Bcl-xL异构体的光损伤

基础研究 pdtmed 1940次浏览 已收录 0个评论

  作者:Xue LY, Chiu SM, Fiebig A, et al.

  目前已公认,抗细胞凋亡癌基因Bcl-2蛋白是酞菁染料Pc4或其他作用于线粒体的光敏剂的光损伤作用靶标。  在免疫印迹分析(Western blots)中观察到的光损伤如原始26-kDa Bcl-2蛋白的缺损,是PDT-剂量依赖性的,发生于多个细胞系、寒冷时,并在光照射后立即出现。

  在我们最初研究中,采用的是抗-Bcl-xS/L的商品抗体,尽管Bcl-xL的大小、序列、位置和功能与Bcl-2类似,但未观察到Bcl-xL的光化学损害。

  现应用免疫印迹分析重新进行这项研究,采用3种抗原决定基特异性抗Bcl-xL抗体中的一种商品抗体(一种来自完整蛋白的多克隆抗体),也采用了原先用过的抗体。所有5种Bcl-xL抗体都能识别细菌表达的Bcl-xL,但不能识别Bcl-2,而一种抗Bcl-2的抗体则能识别Bcl-2,不能识别Bcl-xL。 全部5种Bcl-xL抗体至少都能识别约30kDa移动带的蛋白,其中有2种抗体还能识别33kDa或24kDa的移动带。

  我们观察到Pc4-PDT对于好几种人体癌细胞系,除33kDa蛋白类外,对所有Bcl-xL相关的蛋白都引起光损伤。结果表明,除了可预料到的可能反映抗原决定基暴露的数量差异,抗体还可检测到分子量明显不同的蛋白,它们可能是Bcl-xL的不同异构体或翻译后修饰了的Bcl-xL形式。未发现PDT诱导磷酸化或降解的证据。定位于线粒体的Bcl-xL比胞汁中的Bcl-xL对光损伤敏感得多,这与原先在Bcl-2所见的一样,提示定位于膜上的Bcl-xL才对光损伤敏感。

  Oncogene. 2003 Dec 18;22(58):9197-204


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